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カテゴリー: molecular biology

pBlueScript II

2010年4月5日 村上 徹 molecular biology

Stratageneのクローニングベクター サイト 説明書 ポリリンカーの順(SK)方向、逆(KS)方向 f1開始点の順(+)方向、逆(-)方向 アンピシリン耐性 青/白スクリーニング T3 20-mer、T7 22-m

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BigDye Terminator v.3.1

2008年1月25日 村上 徹 molecular biology

Quick Reference Guide(プログラム、反応後の精製法。調製は下記) Protocol(29ページの表を10μLで調製) PRODUCT BULLETIN

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SYBR Safe DNA Gel Stain

2007年9月12日 村上 徹 molecular biology

クローニングのためB励起を使いたいときに。 10,000倍ストックを希釈して使用する。ゲルを作るときに加えるか、泳動後50ml TAEで希釈したもので30分間染色。UVまたはB励起。RNAは染まらない。変異原性が低い。ガ

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付着末端の迅速ライゲーション

2006年10月6日 村上 徹 molecular biology

Invitrogen T4 Ligase(1u/μl、 5x buffer付)を使用 インサート:ベクターのモル比を3:1にする 5X Ligase Reaction Buffer 4 μl Vector DNA 3〜3

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In-Fusion Dry-Down PCR Cloning Kit

2006年9月27日 村上 徹 molecular biology

インサート:ベクター = 2 : 1になるように加えるインサートの量(1 kbあたり): 100 ng pDNR-Dual + 41 ng/kb インサート 100 ng pDNR-CMV + 36 ng/kb インサー

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SYBR Gold

2006年9月25日 村上 徹 molecular biology

DNAとRNAを染める。高感度。UVまたは青いトランスイルミネーターで可視化(吸収=300 nmと495 nm、蛍光=537 nm)。泳動後にゲルを染める(ゲルやサンプルに混ぜると泳動が乱れる) ストック 10,000×

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6× Loading Buffer

2006年9月14日 村上 徹 buffers & media, molecular biology

核酸のアガロース電気泳動用 10 mg bromophenol blue、10 mg xylene cyanol FF、10 mg orange G のうち1つ以上 4 g sucrose、1.5 g Ficoll 40

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BigDyeを1/8に節約する

2006年9月13日 村上 徹 molecular biology

1 μl BigDye Terminator Ready Reaction Mix 1.5 μl 5× Sequencing buffer 0.8 pmol primer 50〜120 ng template dsDNA

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TaKaRa PrimeSTAR HS

2006年9月7日 村上 徹 molecular biology

高い正確性と高い増幅率を併せ持つPCR酵素 常温下でのDNA polymerase活性・exonuclease活性を抑える抗体を含む 平滑末端 10 μl 5x PrimeSTAR Buffer 4 μl 2.5 mM

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PCRによるインサートのチェック

2006年9月7日 村上 徹 molecular biology

コロニーのピックアップ PCRチューブにLBを10 μlずつ分注する 20 μlのマイクロピペットに滅菌したチップを取り付け、チップの先端をコロニーに当て、斜め上にすくうようにコロニーを拾う PCRチューブにチップを差し

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