固定 4% PFA / PBSで灌流固定 組織を切り出し、数時間浸漬固定 30% sucrose / PBS、4℃、O/N OCTコンパウンドに包埋しLN2で凍結（クラックできないよう注意） 10µmでクライオスタット切
カテゴリー: buffers & media
in situハイブリダイゼーションで染色した胚のClearing法
Clearingとは、顕微鏡観察のために標本を透明にする処理のこと。標本と屈折率の近い溶媒に標本を浸漬し、界面での光の散乱を低減させる。in situハイブリダイゼーションの場合、未反応の基質を溶かして染色のコントラスト
保存剤
溶液に下のいずれかを加える： 1 mg/ml NaN3 0.1 mg/ml thimerosal
6× Loading Buffer
核酸のアガロース電気泳動用 10 mg bromophenol blue、10 mg xylene cyanol FF、10 mg orange G のうち１つ以上 4 g sucrose、1.5 g Ficoll 40
Embryo medium
ゼブラフィッシュ胚の実験に用いる CaとMgは1×、それ以外は1/10×のHank’s BSS 100 ml Hank’s BSS w/o Ca, Mg 10 ml Hank’s st
Microinjection buffer
ゼブラフィッシュでの強制発現のためRNAやDNAをマイクロインジェクションするときに用いる 0.25% phenol red 140 mM KCl 1 mM MgCl 8 mM NaCl 10 mM Hepes, pH
2% X-gal
0.2 g 5-bromo-4-chloro-3-inodlyl-β-D-galactopyranoside (X-gal) 10 ml dimethylformamide (DMF) -20℃で保存 10センチLB寒天
1,000× アンピシリン
アンピシリン・ナトリウム塩を蒸留水で50mg/mlに溶解 シリンジフィルダーでろ過滅菌 1 mlに分注し、-20℃で凍結保存 1,000倍希釈で使用
SOB、SOC
SOB 2 g Bacto-tryptone 0.5 g Bacto-yeast extract 0.05 g NaCl 0.25 ml 1 M KCl 90 ml H2O 10 M NaOHでpH 7.0 にする（約1
LB
10 g Bacto-tryptone 5 g Bacto-yeast extract 10 g NaCl 900 ml H2O 10 M NaOH（約200 μl）を加えてpH 7.0にする H2Oを加えて1リットルに