スライドガラスのAPESコーティング

凍結切片をスライドガラスに貼り付けるための処理

  1. スライドガラスをラックに入れる
  2. 洗剤と超音波洗浄器で洗浄
  3. 温水で十分にすすぐ
  4. 蒸留水ですすぐ
  5. 一晩乾燥
  6. APES(3-aminopropyltriethoxysilane)をアセトンまたはメタノールで2%に希釈(要時調製)
  7. スライドガラスをAPES溶液に30秒間浸す
  8. アセトンまたはエタノールに30秒間浸す
  9. 繰り返し
  10. 蒸留水に30秒間浸す
  11. 繰り返し
  12. 一晩乾燥


成功のポイントは、スライドガラスを十分に洗浄すること。洗浄が不十分だとコーティングがなされず、切片がはがれやすくなる。

うまくできたスライドを使うと、凍結切片を貼り付けてすぐ乾かないうちに水道の流水を当ててもはがれない。ただし、次のような場合にははがれやすくなることがある:

  • 切片が厚いとき(20μm以上)
  • 固い組織(筋など)で切片にしわが多いとき