道具
●FALCON 353047 24well 細胞培養用マルチウェルプレート
※細胞培養用ですが在庫が余っているので代用しています
もし使い切った場合は他の廉価版の24wellプレートに切り替えます
●ネイル用ブラシ (ダイソーで7本で100円で売っている)
試薬(保存場所)
PBS (室温または4℃)
0.5% Triton-X100/PBS (4℃)
Normal Donkey Serum (Jackson) (-20℃)
手順
DAY1
1. 使用するwellに250μLの0.5% Triton-X100/PBSを入れる
2. ネイル用ブラシを使って切片を掬って入れる
3. 室温で振とう、30min (permeabilize)
4. NDSを5μL加える(final 2%)
5. 室温で振とう、30min (blocking)
6. 1次抗体を適量加える
7. 室温で振とう、O/N
DAY2
1. PBSに交換(洗びんから適量)5min x 3
2. 2次抗体を適量加える(2次抗体はCan Get Signalに希釈する)
3. 室温で振とう、60min
4. PBSに交換(洗びんから適量)5min x 3
5. スライドガラスに十分量のPBSを垂らす
6. ネイル用ブラシを使って切片を掬ってスライドガラスに移す
7. PBSを吸いながら切片の位置を調節する。
8. 封入液を1滴垂らす
9. カバーガラスを被せる
10. 余分な封入液をキムワイプで吸う
←しっかりと吸わないと、スライドGとカバーGに隙間ができてピントが合わない、収差の原因になる
11. カバーガラスの縁にネイルコートを塗る